15. Medios de cultivo más utilizados en el laboratorio
Medios de cultivos más utilizados en el laboratorio
Medios ricos y enriquecidos: No tienen agentes inhibidores
Medios sólidos
Agar nutritivo
Componentes
Caldo nutritivo + Agar
Diferentes versiones con distintos componentes (peptona, triptona-soja, infusión de cerebro y corazón, agar Brúcella, agar Columbia, etc.)
Características
No es diferencial
Usos
Medio rico para el cultivo de microorganismos en general, crece una gran mayoría, excepto algunas muy exigentes
Agar TSA
Componentes
Digestión enzimática de soja y caseína
Características
No es diferencial, si no se le añade sangre
Usos
Medio rico para cultivo de microorganismos en general se usa como base para agar sangre, crecen una gran mayoría, e incluso algunas exigentes, como brúcela, corymebactrium, Listeria
Agar Columbia
Componentes
Peptona, tripteina, extracto de levadura y extracto de corazón, almidón
Características
No es diferencial, si no se le añade sangre
Usos
Medio rico para el cultivo de microorganismos en general. Se usa como base para agar sangre. Crecen una gran mayoría e incluso algunos exigentes al añadir sangre
BHI
Componentes
Infusión de tejidos animales, peptonas, glucosa y tampón
Características
No es diferencial
Usos
Medio rico que permite el crecimiento de una gran mayoría de los microorganismos, menos los exigentes, se puede usar como base para Agar sangre
Agar Sangre
Componentes
Agar base (BHI, Columbia, TSA, Brucella) + 5% sangre de oveja desfribinada
Características
Diferencial, permite ver distintos tipos de hemolisis
Usos
Aislamiento de la gran mayoría de microorganismos incluidos algunos muy exigentes. No permite el crecimiento de Neisseria y Haemophilus
Visualización de colonias
D.- Distingue tres tipos de hemolisis
B.- hemolisis o hemolisis total
d.- hemolisis o hemolisis parcial
Y.- hemolisis o no hemolisis
Agar chocolate
Componentes
Agar sangre, con la sangre lisada (por calentamiento a 80˚ C). Los eritrocitos lisados liberan la hemoglobina y otros nutrientes como factor x (hemina y factor y (NAO)
Características
Ya no es diferencial
Usos
Medio rico que permite el crecimiento de una gran mayoría de microorganismos, incluidos los muy exigentes como Nesseria y Haemophilus
Mueller – Hinton
Componentes
Peptona, almidon, PH 7.3
Características
Transparente para observar bien los halos de inhibición, no tiene PABA (intención como antibióticos) grosor 4mm
Usos
Realizacion de las pruebas de sensibilidad y antibióticos (Baverkilby , dilución en agar y test de épsilon)
Visualización de colonias
Se siembra en césped, tres veces con un hisopo
CALDOS
Caldo nutritivo
Componentes
Extracto de carne con NaCl. Se puede suplementar con extracto de levadura, peptonas, glucosa, etc.
Usos
Para microorganismos no exigentes
MEDIOS SELECTIVOS
Agar McConkey
Componentes
Inhibidores: Cristal violeta y sales biliares. Lactosa como agente diferencial. Rojo neutro como indicador
Características
Selectivo y diferencial
Usos
Aislamiento de bacterias gram negativas (entero bacterias). El colorante cristal violeta inhiben las gram positivas. Las sales biliares inhiben las gram (+) y algunos (-) (no las entero bacterias)
Visualización de colonias
Las entero bacterias fermentadoras de lactosa (E coli, entero bacteria, klebisiella) Se ven rosa/rojo/violeta. E coli : Puede presentar un halo rosa alrededor de las colonias, debido a la precipitación de las sales biliares a PH muy acido. Las no fermentacloras de la lactosa (salmonella, Shigella, providencia) se ven transparentes
Agar verde brillante
Componentes
Inhibidor: Color verde brillante (inhibe gram (+) ). Incluye lactosa y sacarosa. Rojo fenol como indicador
Características
Selectivo y diferencial
Usos
Aislamiento selectivo de especies de salmonella, salvo S, typhi y Sporatyphi. No se recomienda para Shigella
Visualización de colonias
Colonias de salmonella rosas, blancos o transparentes dependiendo de la fermentación de los azucares
Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos especiales. El medio más conocido de este grupo es el agar nutritivo o agar común
Medios de enriquecimiento: Son aquellos que, además de sustancias nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento se hace por adición de sangre u otros productos biológicos aportan dichos factores (Agar chocolate)
Medios selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una población microbiana, se denomina inhibidor. El fundamento de otros medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de salmonellas y frenor el resto de entero bacterias como ejemplo) facilita el crecimiento de población bacteriana especifica
Medios inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo impiden totalmente el crecimiento de una población microbiana, se denomina inhibidor. Podrían ser considerados como una variante mas restrictiva de los medios selectivos. Un medio inhibidor es el McConkey permite el crecimiento gram – e impide el de los gram +
Medios diferenciales: Se utiliza para poner en evidencia características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros o especies. La adición de un azúcar fermentable o un sustrato metabolizable se utilizan para este fin. El medio McConkey es diferencial porque permite distinguir los gérmenes que fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen
Medios de identificación: Son destinados a comprobar alguna cualidad específica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de poseer los elementos necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos. El sustrato específico que vaya hacer metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado.
El agar kliger, el medio de Simmons y el general, cualquier medio que se le haya añadido un elemento diferencial de un microorganismo.