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15. Medios de cultivo más utilizados en el laboratorio

Medios de cultivos más utilizados en el laboratorio

Medios ricos y enriquecidos: No tienen agentes inhibidores

 

Medios sólidos

 

Agar nutritivo

Componentes

Caldo nutritivo + Agar

Diferentes versiones con distintos componentes (peptona, triptona-soja, infusión de cerebro y corazón, agar Brúcella, agar Columbia, etc.)

Características

No es diferencial

Usos

Medio rico para el cultivo de microorganismos en general, crece una gran mayoría, excepto algunas muy exigentes

 

Agar TSA

Componentes

Digestión enzimática de soja y caseína

Características

No es diferencial, si no se le añade sangre

Usos

Medio rico para cultivo de microorganismos en general se usa como base para agar sangre, crecen una gran mayoría, e incluso algunas exigentes, como brúcela, corymebactrium, Listeria

 

 

 

Agar Columbia

Componentes

Peptona, tripteina, extracto de levadura y extracto de corazón, almidón

Características

No es diferencial, si no se le añade sangre   

Usos

Medio rico para el cultivo de microorganismos en general. Se usa como base para agar sangre. Crecen una gran mayoría e incluso algunos exigentes al añadir sangre

 

BHI

Componentes

Infusión de tejidos animales, peptonas, glucosa y tampón

Características

No es diferencial

Usos

Medio rico que permite el crecimiento de una gran mayoría de los microorganismos, menos los exigentes, se puede usar como base para Agar sangre  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Agar Sangre

Componentes

Agar base (BHI, Columbia, TSA, Brucella) + 5% sangre de oveja desfribinada

Características

Diferencial, permite ver distintos tipos de hemolisis

Usos

Aislamiento de la gran mayoría de microorganismos incluidos algunos muy exigentes. No permite el crecimiento de Neisseria y Haemophilus

Visualización de colonias

D.-  Distingue tres tipos de hemolisis

B.- hemolisis o hemolisis total

d.- hemolisis o hemolisis parcial

Y.- hemolisis o no hemolisis

 

 

Agar chocolate

Componentes

Agar sangre, con la sangre lisada (por calentamiento a 80˚ C). Los eritrocitos lisados liberan la hemoglobina y otros nutrientes como factor x (hemina y factor y (NAO)

Características

Ya no es diferencial

Usos

Medio rico que permite el crecimiento de una gran mayoría de microorganismos, incluidos los muy exigentes como Nesseria y Haemophilus

Mueller – Hinton

Componentes

Peptona, almidon, PH 7.3

Características

Transparente para observar bien los halos de inhibición, no tiene PABA (intención como antibióticos) grosor 4mm

Usos

Realizacion de las pruebas de sensibilidad y antibióticos (Baverkilby , dilución en agar y test de épsilon)

Visualización de colonias  

Se siembra en césped, tres veces con un hisopo

 

CALDOS

Caldo nutritivo

Componentes

Extracto de carne  con NaCl. Se puede suplementar con extracto de levadura, peptonas, glucosa, etc.

Usos

Para microorganismos no exigentes

 

 

 

 

 

 

 

MEDIOS SELECTIVOS

Agar McConkey

Componentes

Inhibidores: Cristal violeta y sales biliares. Lactosa como agente diferencial. Rojo neutro como indicador

Características

Selectivo y diferencial

Usos

Aislamiento de bacterias gram negativas  (entero bacterias). El colorante cristal violeta inhiben las gram positivas. Las sales biliares inhiben las gram (+) y algunos (-) (no las entero bacterias)

Visualización de colonias

Las entero bacterias fermentadoras de lactosa (E coli, entero bacteria, klebisiella) Se ven rosa/rojo/violeta. E coli : Puede presentar un halo rosa alrededor de las colonias, debido a la precipitación de las sales biliares a PH muy acido. Las no fermentacloras de la lactosa (salmonella, Shigella, providencia) se ven transparentes

 

Agar verde brillante

Componentes

Inhibidor: Color verde brillante (inhibe gram (+) ). Incluye lactosa y sacarosa. Rojo fenol como indicador

Características

Selectivo y diferencial

Usos

Aislamiento selectivo de especies de salmonella, salvo S, typhi y Sporatyphi. No se recomienda para Shigella

Visualización de colonias

Colonias de salmonella  rosas, blancos o transparentes dependiendo de la fermentación de los azucares

 

 Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos especiales. El medio más conocido de este grupo es el agar nutritivo o agar común

Medios de enriquecimiento: Son aquellos que, además de sustancias nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento se hace por adición de sangre u otros productos biológicos aportan dichos factores (Agar chocolate)

Medios selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una población microbiana, se denomina inhibidor. El fundamento de otros medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de salmonellas y frenor el resto de entero bacterias como ejemplo) facilita el crecimiento de población bacteriana especifica

Medios inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo impiden totalmente el crecimiento de una población microbiana, se denomina inhibidor. Podrían ser considerados como una variante mas restrictiva de los medios selectivos. Un medio inhibidor es el McConkey permite el crecimiento gram – e impide el de los gram +

Medios diferenciales: Se utiliza para poner en evidencia características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros o especies. La adición de un azúcar fermentable o un sustrato metabolizable se utilizan para este fin. El medio McConkey es diferencial porque permite distinguir los gérmenes que fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen

Medios de identificación: Son destinados a comprobar alguna cualidad específica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de poseer los elementos necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos. El sustrato específico que vaya hacer metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado.

El agar kliger, el medio de Simmons y el general, cualquier medio que se le haya añadido un elemento diferencial de un microorganismo.

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