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11. Tipos y medios de cultivo

Medios de cultivo.

 

Son un método para la multiplicación de microorganismos, tales como bacterias, hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado. Son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas optimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.

 

 

Utilización.

 

  • Para el cultivo y cosecha de bacterias para la elaboración de productos biológicos.

  • Para el aislamiento de bacterias desde un material patógeno.

  • Diagnóstico clínico en medicina humana y veterinaria

  • Industria farmacéutica y biotecnológica

  • Industria  alimenticia

  • Otras industrias y sectores productores (agricultura, química )

  • Control del medio ambiente

  • Investigaciones

     

     

     

     

     

     

     

     

     

Clasificación de los Medios de Cultivo

 

 

Anteriormente observamos lo que son los medios de cultivo, por lo consiguiente observaremos como es que se clasifican.

Los medios de cultivo se clasifican según diferentes criterios, pero los más importantes son aquellos que se basan en:

 

a) Origen

b) Utilización

c) Composición

d) Consistencia

 

 

a) Origen

 

1-. Medios Naturales: Son los preparados a partir de sustancias

naturales de origen animal o vegetal como lo pueden ser extractos

de tejidos o infusiones, cuya composición química se conoce exactamente

 

2-. Medios Sintéticos: Son los medios que contiene  una composición

química definida cualitativa y cuantitativamente. Se utilizan para

obtener resultados reproducibles.

 

3-. Semisintéticos: Son los  sintéticos a los que se le añaden factores

de crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como

por ejemplo la levadura.

 

 

b) Utilización

 

1-. Medios Comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda producirse el crecimiento de baterías que no necesiten requerimientos especiales. El medio más conocido de este grupo es el agar nutritivo, que resulta de la adición del agar caldo nutritivo.

 

2-. Medios de Enriquecimiento: Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por adición de sangre u otros productos biológicos (sangre, suero, leche, huevo, etc.) que aportan dichos factores. En ocasiones es posible añadir suplementos artificiales a los medios para producir un enriquecimiento del mismo. El gonococo, por ejemplo, necesita de cistina  y cisteína para su crecimiento.

 

3-. Medios Selectivos: Son los medios utilizados para favorecer el crecimientos de ciertas bacterias contenidas en una población microbiana. El fundamento de estos medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana específica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar el resto de entero bacterias.

 

4-. Medios Inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio

selectivoimpiden totalmente el crecimiento de una población

microbiana, se denomina inhibidor. Los medios inhibidores podrían 

considerarse como una variante más restrictiva de los medios

selectivos. Los medios inhibidores se consiguen habitualmente por

la adición de sustancias antimicrobianas o de cualquier otra que

inhiba completamente el desarrollo de una población determinada.

Un medio inhibidor es el MacConkey que permite el crecimiento de

los gérmenes Gram negativos e impide el crecimiento de Gram

positivos.

 

5-. Medios Diferenciales: se utilizan para poner en evidencia

características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros o

especies. La adición de un azúcar fermentable o sustrato metabolizable se utilizan para este fin. El medio MacConkey es un medio diferencial porque permite distinguir los gérmenes que fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen. También lo son el C.L.E.D (Agar cistina-lactosa deficiente en electrólitos – lactosa+/lactosa -), el agar sangre (tipo hemólisis), el SS (Salmonella Shigella Agar que es doblemente diferencial) etc.

 

6-. Medios de Identificación: Son destinados a comprobar alguna cualidad específica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de poseer los elementos necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos, el sustrato específico que vaya a ser metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado. El agar Kligler, el medio Simmons y en general, cualquier medio al que se le haya añadido un elemento diferencial de un microorganismo, son medios utilizados en identificación.

 

7-. Medios de Multiplicación: Sirven para obtener en gran cantidad de células ante de un microorganismo ya aislado. Se emplean en la obtención de vacunas, en la investigación y en la industria. Los medios más adecuados para la multiplicación suelen ser líquidos. El caldo-infusión cerebro-corazón (BHI), es un ejemplo típico de estos medios.

 

8-. Medios de Conservación: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas razones nos interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como controles de calidad de las pruebas y reactivos utilizados en el laboratorio de microbiología. En el laboratorio se pueden conservar las cepas de tres formas:

-Haciendo pases periódicos de placa a placa.

-Mediante liofilización de una suspensión bacteriana

-Congelando las cepas en leche descremada estéril al 0,1%.

 

9-. Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clínicas que no pueden sembrarse inmediatamente. Su utilización debe hacerse introduciendo la torunda con la que se obtuvo la muestra en el interior del medio (generalmente en un tubo). Son ejemplos típicos de este grupo los medios de Stuart-Amies,Cary-Blair, etc

 

 

c) Composición

 

Según las sustancias que entren a formar parte en su composición,

los medios de cultivo pueden ser clasificados en:

 

1-. Medios Complejos: Fueron los primeros utilizados, y los más

empleados se preparan a partir de tejidos animales, y más

raramente de vegetales. Su composición no es exactamente

definida, y por consiguiente no es rigurosamente constante.

Esto puede tener ciertos inconvenientes en condiciones

experimentales, donde la reproductibilidad no podrá ser exacta.

En la práctica corriente estos medios dan excelentes resultados

y son los más empleados.

 

2-. Medios Sintéticos: Son aquellos que contienen en su composición exclusivamente sustancias químicas conocidas y disueltas en agua destilada en proporciones determinadas, resultando un medio de composición perfectamente definida.

 

3-. Medios Semisintéticos: El gran número de factores de crecimiento exigidos para ciertos gérmenes hace que la fabricación de un medio sintético para estos gérmenes sea imposible o demasiado cara. En este caso se aportan los factores de crecimiento bajo la forma de un extracto orgánico complejo (extracto de levadura, extracto de tejidos, etc.). Ciertos gérmenes no crecen en ningún medio por muy enriquecido que esté éste, haciéndolo exclusivamente en células vivas con unas características determinadas. Ejemplos de este tipo son, aparte de los virus, las Chlamydias, Rickettsias, etc.

 

 

d) Consistencia

 

1-.Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado,

denominándose por esta razón caldos. El medio líquido más

utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente

de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente

cuando se pretende la obtención de una suspensión bacteriana

de una determinada concentración.

 

2-. Medios sólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos,

agregándoles un agente gelificante. Los más utilizados son la

gelatina y el agar. Gelatina: Es una proteína animal obtenida de

los huesos. Tiene el inconveniente de que es hidrolizada por muchas bacterias, y además su uso está muy limitado porque su punto de fusión es bajo (licúa a temperatura ambiente) razón por la que no puede utilizarse para cultivos a 37ºC, que es la tempera óptima de crecimiento para muchos microorganismos. Agar-agar: Es un polímero d3e azúcares obtenido de algas marinas. Se trata de una molécula insoluble enagua pero soluble en agua caliente; una solución al 1,5% p/v forma un gel firme entre 32 y 39ºC y nose funde por debajo de 85ºC. Funde a 90ºC y solidifica una vez fundido alrededor de los 45ºC. Tiene el inconveniente de que introduce compuestos orgánicos indefinidos que pueden falsear los resultados de las necesidades nutritivas de un microorganismo.

 

3-. Medios semisólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregando a éstos un agente solidifícate en una proporción menor que para preparar medios sólidos. Uno de sus usos es la investigación de la movilidad de las bacterias

 

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